Metodo di identificazione delle capsule di gelatina bovina e suina

L'uso di capsule di gelatina nei settori farmaceutico e nutraceutico è diffuso grazie alla loro capacità di incapsulare una varietà di composti. Tuttavia, la fonte di gelatina utilizzata in queste capsule può variare, con bovina e suina come le due fonti più comuni. In questo post del blog, in qualità di produttore personalizzato di capsule di gelatina bovina di alta qualità, Wecaps condividerà con voi il metodo di identificazione delle capsule di gelatina bovina e suina.

Comprensione della composizione della gelatina

La gelatina è una proteina derivata dal collagene, che viene estratto dalle ossa, dalla pelle e dai tessuti connettivi degli animali. La differenza principale tra la gelatina bovina e quella suina risiede nei loro animali di origine e nei tipi specifici di collagene che contengono. La gelatina bovina deriva principalmente dal collagene di tipo I presente nelle mucche, mentre la gelatina suina deriva dal collagene di tipo I presente nei maiali.

Metodi di identificazione

Tecniche molecolari

a. Reazione a catena della polimerasi (PCR)

La PCR è una potente tecnica di biologia molecolare utilizzata per amplificare sequenze specifiche di DNA, rendendo possibile l'identificazione del materiale genetico della fonte della gelatina. Il metodo prevede:

1. Preparazione del campione: estrarre il DNA dalle capsule di gelatina utilizzando un kit di estrazione del DNA. Ciò comporta lo scioglimento della gelatina in una soluzione tampone e il trattamento con enzimi per rilasciare il DNA.

2. Amplificazione PCR: utilizzare primer specifici per il DNA bovino o suino. Ad esempio, possono essere utilizzati primer che hanno come target le sequenze di DNA mitocondriale (mtDNA) specifiche del bovino o geni mitocondriali specifici del suino come il citocromo b. Il processo PCR amplifica queste sequenze specifiche se presenti.

3. Elettroforesi su gel: far passare i prodotti della PCR su un gel di agarosio per separarli in base alle dimensioni. La presenza di bande specifiche corrispondenti al DNA bovino o suino confermerà la fonte di gelatina.

b. PCR in tempo reale (qPCR)

La PCR in tempo reale, o PCR quantitativa, è una tecnica avanzata che consente la quantificazione del DNA e fornisce una maggiore sensibilità rispetto alla PCR tradizionale. Comporta:

1. Preparazione del campione: simile alla PCR, estrarre il DNA dalle capsule di gelatina.

2. Real-Time PCR: utilizza sonde o coloranti fluorescenti che si legano a sequenze specifiche di DNA. L'intensità della fluorescenza è correlata alla quantità di DNA target, consentendo la quantificazione del DNA bovino o suino.

3. Analisi dei dati: analizzare i dati di fluorescenza per determinare la presenza e la quantità di DNA bovino o suino, identificando così la fonte della gelatina.

Tecniche basate sulle proteine

a. Spettrometria di massa (MS)

La spettrometria di massa può essere utilizzata per analizzare la composizione proteica della gelatina. Il processo include:

1. Preparazione del campione: sciogliere la gelatina in un solvente appropriato e digerirla con enzimi proteolitici per scomporla in peptidi.

2. Analisi dei peptidi: utilizzare la spettrometria di massa per analizzare i frammenti peptidici. Confrontare i profili peptidici con i profili noti di gelatina bovina e suina per identificare la fonte.

b. Desorbimento/ionizzazione laser assistita da matrice (MALDI) MS

MALDI MS è un tipo specifico di spettrometria di massa utile per identificare proteine e peptidi. Il processo prevede:

1. Preparazione del campione: preparare una matrice con il campione di gelatina e applicarla alla piastra bersaglio MALDI.

2. Spettrometria di massa: analizzare il campione per ottenere uno spettro di massa. I picchi dello spettro corrispondono alle masse dei frammenti peptidici e possono essere confrontati con gli spettri noti di gelatina bovina e suina.

c. Elettroforesi

L'elettroforesi su gel di poliacrilammide con sodio dodecil solfato (SDS-PAGE) è una tecnica utilizzata per separare le proteine in base alle loro dimensioni:

1. Preparazione del campione: sciogliere le capsule di gelatina in un tampone per campioni e applicarle su un gel SDS-PAGE.

2. Elettroforesi: separare le proteine in base alle dimensioni e confrontare il modello di bande del gel con i modelli di riferimento della gelatina bovina e suina.

3. Identificazione delle proteine: utilizzare tecniche di Western blotting o colorazione per identificare proteine specifiche caratteristiche della gelatina bovina o suina.

Tecniche spettroscopiche

a. Spettroscopia infrarossa a trasformata di Fourier (FTIR)

La spettroscopia FTIR identifica le composizioni molecolari in base all'assorbimento infrarosso:

1. Preparazione del campione: preparare il campione di gelatina come una pellicola sottile o utilizzando un pellet di KBr.

2. Spettroscopia: analizzare il campione utilizzando FTIR. Diverse fonti di gelatina hanno distinti modelli di assorbimento infrarosso corrispondenti alle loro vibrazioni molecolari.

3. Interpretazione dei dati: confrontare gli spettri FTIR con gli spettri di riferimento per la gelatina bovina e suina.

b. Spettroscopia di risonanza magnetica nucleare (NMR)

La spettroscopia NMR fornisce informazioni dettagliate sulla struttura molecolare della gelatina:

1. Preparazione del campione: sciogliere la gelatina in un solvente adatto per l'analisi NMR.

2. Spettroscopia: eseguire la spettroscopia NMR per ottenere dati sullo spostamento chimico. Analizzare gli spettri per identificare caratteristiche molecolari specifiche della gelatina bovina o suina.

3. Confronto: confrontare i dati NMR con gli spettri di riferimento per la gelatina bovina e suina nota.

Le capsule di gelatina Wecaps sono specificamente progettate come forma di dosaggio orale per formulazioni farmaceutiche. Queste capsule sono realizzate in collagene bovino di alta qualità e prodotte con un processo controllato con precisione. Vantano un'eccellente biocompatibilità, stabilità e sicurezza, rendendole il materiale ottimale per i vettori di farmaci. Benvenuti a consultare il nostro servizio di personalizzazione delle capsule di gelatina!